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石蜡切片免疫组化实验-卵白素-生物素-过氧化物酶复合物（ABC法）浏览数:2240次
实验材料 蜡块切片 试剂、试剂盒 多聚甲醛 蒸馏水 蔗糖 过氧化氢 甲醇 PBS 酒精 KPBS 牛血清白蛋白 叠氮纳 一抗 二抗 仪器、耗材 冰箱 显微镜 烧杯 1. 4%多聚甲醛常规灌注固定，取材并置20%蔗糖溶液（4℃）中过夜。蜡块制作。切片，贴片。0.01 M KPBS清洗5 min×3后； 2. 加入配好的0.3%的过氧化氢甲醇溶液（甲醇80 ml+0.01 M KPBS 100 ml+30%过氧化氢）30 min，以消除内源性过氧化物酶的影响，0.01 M PBS清洗5 min×3； 3. 加入配好的0.3% Triton X100（30% Triton X100+0.01 M KPBS 100 ml）30 min，以增加细胞的通透性，0.01 M KPBS清洗5 min×3； 4. 加入用血清稀释液（牛血清白蛋白1.00 g+0.01 M PBS 100 ml+叠氮纳0.08 g）稀释的一抗，4℃存放24-48 h；吸去抗体，0.01 M KPBS洗5 min×3； 5. 加入0.01 M KPBS稀释的的二抗，室温孵育2 h。0.01 M KPBS洗5 min×3； 6. 加入ABC复合物之类的抗体，室温孵育2 h，0.01 M KPBS洗5 min×3；蒸馏水迅速冲三次； 7. 加入显色液，进行免疫组织化学显色，时间一般不超过30 min，可不时在显微镜下进行观察，待细胞着色而背底颜色较淡时马上吸去显色液，用蒸馏水迅速冲三次后加入0.01 M KPBS终止反应； 8. 梯度酒精脱水之后，封片，拍照。 点击查看更多实验室耗材：http://www.whb-bio.com
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