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6孔细胞培养板接种和换液

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问:我的细胞传代很正常,但一种到六孔板里(不管加药和对照),总有两三个孔(随机)细胞长得不好,很小,像破碎了。有人遇到过这种情况吗?到底是啥原因呢?请各位指点
答:可能跟你加液的温度有关。如果你细胞刚刚拿出来换液加液,培养基也是从4度冰箱拿出来不久,很容易细胞就会冻死了。建议你最好把培养基先在培养箱里边孵育15min先。
另外,跟你细胞的生长状态也有关。加药之前的细胞可以用高点的血清浓度培养。保证细胞状态良好。
或者放在37度水浴锅里孵育也可以,或者是培养板本身的问题,你再换换其他培养板试试看。再有可能就是细胞状态问题了,种板时的血清浓度调高试一下
问:最近几天,我用六孔培养板接种细胞,培养24小时后更换培养基,在更换培养基之前,显微镜观察到细胞贴壁,状态非常的好,更换了培养基后,立即用显微镜观察,发现每个孔中都近乎有一半的细胞表现出近乎死亡的状态。细胞变得非常小,产生大量的碎片,而另一半的细胞一切正常,异常细胞与正常细胞之间存在一条分水岭,上半个圆是好的,下半个圆就不好,这是怎么一回事?
答:你可以看一下是不是培养板没放水平。有一回我也出现过这种情况。
你的培养液如何,如果培养液过期,细胞就不会贴壁。换一点新配制的培养液试一试。
我也经常碰到,我想可能是板的问题,换一个牌子的板或换用培养瓶就没问题了。
不知楼主所需换液的培养板多不多,换培养基的时候如果没有注意风机的影响,特别是所需换液的培养板很多时,容易使细胞因风吹失水而干缩破裂。如果如此,换液时应该逐个培养板进行,别怕浪费吸管,注意操作的效率!

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